6533b825fe1ef96bd128224a

RESEARCH PRODUCT

No cilvēka taukaudiem izdalītu mezenhimālo cilmes šūnu in vitro senescences raksturojums

subject

description

Darba mērķis bija raksturot no cilvēka taukaudiem izdalītu mezenhimālo cilmes šūnu in vitro senescenci. Darbā izmantotas no 8 donoriem iegūtas MCŠ, kas kultivētas līdz proliferācijas aresta sasniegšanai. MCŠ senescence tika raksturota pēc (1) fenotipa (morfoloģija, proliferācija, adipo- un osteogēnais diferenciācijas potenciāls, b-galaktozidāzes ekspresija, metaboliskā aktivitāte, peroksīdu uzkrāšanās), (2) gēnu ekspresijas un (3) telomēru relatīvā garuma izmaiņām. Rezultāti norāda, ka MCŠ raksturīga morfoloģijas, proliferatīvo un diferencēšanās spēju variācija starp donoriem. Ilgstoši kultivējot MCŠ, tika novērotas morfoloģijas izmaiņas, dubultošanās laika un b-galaktozidāzes ekspresijas palielināšanās un koloniju veidošanas spējas un diferenciācijas potenciāla samazināšanās, savukārt metabolisma testa vērtības pieaugums pēdējās pasāžās saistāms ar senescences fenotipu. Gēnu ekspresijas analīze norāda individuālu ekspresijas profilu katram donoram. Konstatēts, ka MCŠ sastāv no divām labi nodalāmām subpopulācijām, kas atšķiras pēc šūnu izmēra un telomēru garuma. Trim šūnu kultūrām raksturīga replikatīvā senescence, pārējām - priekšlaicīgā. Atslēgvārdi: MCŠ, ASC, senescence, telomēras, Flow FISH, b-Gal, CFU, MTT, gēnu ekspresija, subpopulācijas.