0000000001002295
AUTHOR
Ilva Liekniņa
N‐Terminal Modification of Gly‐His‐Tagged Proteins with Azidogluconolactone
Site-specific protein modifications are vital for biopharmaceutical drug development. Gluconoylation is a non-enzymatic, post-translational modification of N-terminal HisTags. We report high-yield, site-selective inâ vitro α-aminoacylation of peptides, glycoproteins, antibodies, and virus-like particles (VLPs) with azidogluconolactone at pHâ 7.5 in 1â h. Conjugates slowly hydrolyse, but diol-masking with borate esters inhibits reversibility. In an example, we multimerise azidogluconoylated SARS-CoV-2 receptor-binding domain (RBD) onto VLPs via click-chemistry, to give a COVID-19 vaccine. Compared to yeast antigen, HEK-derived RBD was immunologically superior, likely due to observed diffe…
Virus like particles of ssRNA bacteriophages - versatile tools in vaccine development
Vīrusveidīgās daļiņas (VLP) tiek izmantotas kā efektīvi dažādu antigēnu nesēji, tāpēc tās ir piemērotas vakcīnu izstrādei. Īpaši no ssRNS fāgiem iegūtām VLP ir pārliecinošas priekšrocības to unikālo īpašību dēļ: efektīva producēšanās, viegla un ātra attīrīšanas tehnoloģija, zemas ražošanas izmaksas. Pašlaik pieejamo ssRNS fāgu VLP klāsts ir ierobežots, tāpēc ir jāatrod jaunas alternatīvas zināmajā diapazonā. Pētījumā tika atrastas apmēram 80 jaunas VLP, kuras veidoja hipotētisko ssRNS fāgu apvalka proteīni. Veicot jauno VLP strukturālos pētījumus, tika atklātas arī vairākas iepriekš nenovērotas pazīmes, kā jauni sekundārās struktūras elementi un rajoni, kuri saista dsRNS fragmentus. Pēdējā …