6533b7d1fe1ef96bd125c68f

RESEARCH PRODUCT

Rauga Kluyveromyces marxianus acetāta tolerance

subject

description

Maģistra darba mērķis bija novērtēt rauga Kluyveromyces marxianus iespējamos šūnu adaptācijas mehānismus pret acetāta izraisīto stresu. Fermentācijās ar laktozi saturošu substrātu un pievienotu 40 mM acetātu šūnu kultūrai tika novērota paildzināta lag fāze, kuras laikā palielinājās šūnu populācijas rezistence pret acetātu. Pētījumos tika novērota rauga Kluyveromyces marxianus DSM 5422 šūnu populācijas heterogenitāte, kas liecina, ka daļa no šūnām sākotnēji ir tolerantāka pret organisko skābju izraisīto stresu. Kultivējot raugu K. marxianus laktozi saturošā barotnē ar pievienotu acetātu, tika novērota iekššūnu vides pH palielināšanās. Iespējams, raugam K. marxianus vājo skābju izraisīta stresa apstākļos notiek paaugstināts protonu transports no citosola, lai uzturētu neitrālu iekššūnu vides pH. Kultivējot K. marxianus DSM 5422 pussintētiskajā 25 g/L laktozes barotnē ar pievienotu acetātu, tika novērots, ka raugs asimilē laktozi un acetātu vienlaicīgi pie vides pH 4,0. Acetāta negatīvā ietekme uz augšanas parametriem novērota laktozi saturošā substrātā pie vides pH 4,5 un 5,0. Rauga K. marxianus NCYC 2597 celmam β-galaktozidāzes aktivitāte tika novērota periplazmā, laktozes utilizācija pie augstāk minētajām pH vērtībām netika novērota. Savukārt celmiem DSM 5422, DSM 5418, DSM 4906 un NCYC 2791, kuriem laktozes hidrolīze novērota gan citosolā, gan periplazmā, pie zemām pH vērtībām, salīdzinot ar NCYC 2597, acetāta negatīvā ietekme izpaužas mazāk. Pētījumi tika veikti Latvijas Universitātes Mikrobioloģijas un Biotehnoloģijas Institūta Ogļhidrātu biokonversijas laboratorijā.