6533b7d8fe1ef96bd1269da9

RESEARCH PRODUCT

Ksenobiotiku metabolisma enzīmu citohroma P450 aktivitātes audzēju šūnu līnijās

subject

description

Jaunu zāļu vielu meklējumi pasaulē notiek ļoti aktīvi. Šobrīd jauno savienojumu īpašību, tai skaitā toksiskuma, izpētei plaši izmanto šūnu līniju modeļus in vitro. Viena no šūnu svarīgākajām sistēmām, kurai ir milzīga ietekme uz jebkura preparāta darbību organismā, ir citohroma P450 sistēma. Tai ir svarīga loma ķīmiskās homeostāzes uzturēšanā organismā gan fozioloģiskos, gan pataloģiskos apstākļos. Citohromi piedalās ļoti daudzu ksenobiotiķu eliminācijā no šūnām. Turklāt, zinot, ka ksenobiotiķu biotransformācijas procesā var veidoties organismam bīstami toksiski metabolīti, zināšanas par citohromu aktivitāti kļūst īpaši svarīgas. Šī darba mērķis ir citohroma P450 sistēmas raksturojums šūnu līniju modeļos, kuri tiek izmantoti jaunu zāļu vielu skrīningā. Tika izpētīta 10 dažādu citohroma P450 izoformu aktivitāte trijās šūnu līnijās: SHSY5Y сilvēka neiroblastomā, HepG2 cilvēka hapatocītu karcinomā, H9C2 žurku embrionālajos mioblastos. Iegūtie rezultāti parādīja, ka hepatocītos, kur notiek visaktīvākie metabolisma procesi, ir aktīvas 8 citohroma izoformas. Bet neiroblastomā un miocītos tikai 6. Augstāko aktivitāti visās šūnu līnijās uzradīja CYP2A6 izoforma, kas katalizē daudzu klīniski nozīmīgu zāļu: antidepresantu, neiroleptiķu, anti-aritmisko preparātu, lipofīlo beta adrenoreceptoru blokatoru un opioīdu metabolismu. Ilgstošas šūnu kultivācijas laikā un šūnu diferenciācijas rezultātā tika novērotas citohromu aktivitātes izmaiņas. Hepatocītu šūnās, kas tika kultivētas 20 pasāžas, samazinājās CYP2D6 un CYP2C19 izoformu aktivitāte un pieauga CYP3A4, CYP2E1 un CYP2B6 aktivitāte. Savukārt, šūnu diferenciācija veicina visu pārbaudīto izoformu aktivitātes pieaugumu, izņemot CYP2D6, kura samazinājās. Neiroblastomas šūnās gan diferenciācija, gan kultivēšanas laiks izsauc CYP2D6, CYP2C19, CYP3A4 un CYP2E1 izoformu aktivitātes pieaugumu. Mioblastos, ilgstošas kultivācijas procesā, nekonstatējām būtiskas citohromu aktivitātes izmaiņas. Ņemot vēra, ka izmaiņas fermentu aktivitātē sasniedza pat 18 reizes, šūnu kultivēšanas ilgums un diferenciācija var ievērojami ietekmēt jauno savienojumu skrīninga rezultātus.