6533b823fe1ef96bd127e5ed

RESEARCH PRODUCT

Ogļskābes anhidrāzes IX ietekme uz signālceļiem krūts vēža šūnu līnijās

subject

description

Ogļskābes anhidrāze IX (CAIX) ir hipoksijas inducēts enzīms, kas ir iesaistīts skābju-bāzu homeostāzes nodrošināšanā hipoksijas apstākļos. Pētījumi liecina, ka tā ir funkcionāli iesaistīta krūts vēža progresijā un nesen identificēta kā zāļu mērķis. Šajā darbā mēs centāmies noskaidrot, kā CAIX ietekmē dažādu signālceļu aktivitāti krūts vēža šūnās. Lai iegūtu ieskatu procesos, ko ietekmē ogļskābes anhidrāze IX (CAIX), darbā tika izmantotas trīs dažādu subtipu krūts vēža šūnu līnijas ar aktīvu vai nomāktu CAIX gēnu. Šīs šūnu līnijas tika kultivētas hipoksiskos un normokiskos apstākļos, kas tika pierādīti ar imunocitoķīmijas un Vesterna blota analīzēm. No šīm šūnām tika izdalīta augstas kvalitātes RNS, kuras tika izmantotas gēnu ekspresijas profilēšanas eksperimentā, lai noskaidrotu, kuru gēnu ekspresijas ietekmē CAIX nomākšana. Identificētie kandidātgēni tika validēti ar RT-qPCR metodi. Iegūtie rezultāti parādīja, ka gēnu ekspresijas līmenī šūnās ar aktīvu vai nomāktu CAIX gēnu atbildes reakcija uz hipoksiju ir līdzīga. Tomēr tika identificēti vairāki gēni, to skaitā STC1, XIST, AZGP1 un LAMP3, kuru ekspresiju ietekmē CAIX nomākšana. Tas liecina, ka CAIX ietekmē angioģenēzi, metastāžu un šūnu migrāciju saistītos procesus.