6533b827fe1ef96bd1285fbc

RESEARCH PRODUCT

Streptococcus Mutans sortāzes A ekspresija, attīrīšana un raksturošana zāļu vielu skrīningam

subject

description

Slimības, ko izraisa patogēni, īpaši multirezistenti, piemēram, Streptococcus mutans, ir nepieciešams apkarot. Multirezistentu grampozitīvu patogēnu baktēriju transpeptidāzes - sortāzes A - mērķproteīna inhibēšana mazina patogēnu saistīšanās spēju - virulenci - un līdz ar to arī rezistenci. Bakalaura darbā Streptococcus mutans sortāze A tiek izmantota kā instruments, lai pārbaudītu novatoriskus ķīmiskus savienojumus, kam piemīt spēja inhibēt sortāzi A. Mērķis bija, izmantojot zāļu vielu skrīninga metodi, atlasīt ķīmiskas vielas, kam piemīt sortāzes A inhibēšana un kuras varētu izmantot, lai apkarotu multirezistentu grampozitīvu patogēnu izraistītas slimības. Streptococcus mutans sortāzes A 40N-gala delēcijas rekombinants konstrukts tika ekspresēts, iegūstot proteīnu, kas tika attīrīts un kam tika pārbaudīta enzimātiskā aktivitāte. Zāļu vielu skrīningam izmantoja konstruktu ar papildus sešiem histidīniem, jo tas labāk ekspresējās. No eventuāliem, iepriekš zāļu skrīningā atlasītiem 14 inhibitoriem pēc detalizētas pārbaudes tika izraudzītas divi, kam piemīt vislabākā Streptococcus mutans sortāzes A delta N40 inhibēšanas spēja. Tās ir 4-(dimethylamino)-2-fluoro-N-[4-(pyrrolidin-1-yl) pyrimidin-5-yl]benzamide (C17H20FN5O) [7.viela] un 3-(1,3-dihydro-2-benzofuran-5-yl)-1-(4 hydroxyphenyl)urea (C15H14N2O3) [10.viela]. No šīm divām vielām specifiskākā Streptococcus mutans virulences ierobežošanā bija 7., jo tai bija specifiski augsta inhibēšana, tā praktiski neietekmē baktēriju augšanu un ir maz toksiska eikariotiskām šūnām. Bakalaura darbu izstrādāju Latvijas Biomedicīnas pētījumu un studiju centrā, Strukturālās bioloģijas pētījumu A. Leončika grupā.