6533b82efe1ef96bd129367c

RESEARCH PRODUCT

Streptococcus pneumoniae sortāzes A inhibitoru atlase multirezistentu patogēnu izraisīto infekcijas slimību terapijai

subject

description

Darba mērķis ir atrast jaunas novatoriskas vielas, kas inhibē Grampozitīvās baktērijas Streptococcus pneumoniae transpeptidāzi sortāzi A. Šo inhibitoru atlasei tika izmantota rekombinanta S.pneumoniae sortāzes A katalītisko domēnu kodējoša konstrukcija bez N terminālā reģiona. Šāda rekombinanta transpeptidāze tika ekspresēta E.coli ekspresijas sistēmā un sintezētais proteīns izrādījās šķīstošs. Pēc attīrīšanas sortāze tika izmantota inhibitoru atlasei, izmantojot skrīningu, kas balstās uz fluorescences rezonanses enerģijas pārnesi (FRET). Pavisam tika pārbaudīti 966 potenciāli inhibitori savienojumi, no kuriem tālākām pārbaudēm tika atlasīti trīs labākie, kuri inhibēja IC50 testā izmantotās sortāzes no 38.18 uM līdz 97.85uM koncentrācijai. Pēc antibakteriālās iedarbības un šūnu citotoksiskuma pārbaudēm rezultātā tika atlasīti divi savienojumi, kuriem bija samērā zema citotoksiska iedarbība, attiecīgi 60 uM un 87 uM. Abas atlasītās vielas pēc to ķīmiskas modificēšanas un uzlabošanas var tikt izmantotas kā iespējami zāļu prototipi, lai apkarotu multirezistentu grampozitīvo patogēnu virulenci.