6533b834fe1ef96bd129dae0

RESEARCH PRODUCT

Doksorubicīna un 5-Flioruracila pretvēža darbības aktivitātes noteikšana kombinācijā ar onkolītiskiem alfavīrusu vektoriem

subject

description

Onkolītiskā viroterapija ir daudzsološa gēnu terapijas forma vēža ārstēšanā. Šajā darbā tika pētīts onkolītiskā alfavīrusu pārstāvja Semliki meža vīrusa potenciāls vēža terapijā. Tā kā Semliki meža vīrusam nav izstrādāts specifisks pielietojums peļu melanomas audzēja šūnās B16-F10, alfavīrusa iedarbība tika pētīta šajā šūnu kultūrā. Šī darba mērķis bija pārbaudīt uz Semliki meža vīrusa (SFV) replikona pamata izveidota rekombinanta alfavīrusa vektora rekSFV1/dsRed terapeitisko iedarbību peļu melanomas šūnu līnijā B16-F10 in vitro kombinācijā ar 5Fu (5-fluoruracils) un DOX (doksorubicīns) ķīmijpreparātiem. Tika iegūts rekSFV1/dsRed vīruss ar augstu vīrusa daļiņu titru. Tika mikroskopiski pierādīta rekSFV spēja replicēties B16-F10 šūnās pēc to elektroporācijas ar rekSFV1/dsRed RNS, bet parādīta samazināta rekSFV inficētspēja B16-F10 šūnās. Tika pārbaudīta šūnu proliferācija, izmantojot MTT metodi piecu dienu garumā pēc rekSFV kombinētas iedarbības uz B16-F10 šūnām ar dažādu koncentrāciju ķīmijpreparātiem DOX un 5Fu, lai noteiktu kombinācijterapijas citopātisko efektu. RekSFV sinerģija ar ķīmijpreparātiem bija novērojama abos gadījumos. RekSFV kombinācijā ar DOX uzrādīja zemu citopātiskā efekta potenciālu, bet augstu B16-F10 šūnu inficētspēju. Kombinācijā ar 5Fu rekSFV uzrādīja augstu citopātiskā efekta potenciālu, bet zemu inficētspēju B16-F10 šūnās. Lai pārliecinātos par transdukcijas efektivitāti B16-F10 šūnās pēc to apstrādes ar ķīmijpreparātiem, tika veikta FACS analīze. Secinājām, ka rekSFV ir augsts citopātiskais potenciāls peļu melanomas šūnās, bet nepieciešama specifiskas stratēģijas izveide rekSFV vektora izmantojumam B16-F10 šūnu kultūrā. Atslēgas vārdi: onkolītiski vīrusi, rekSFV vektors, ķīmijterapija, pretvēža terapija.