6533b835fe1ef96bd129ef1a

RESEARCH PRODUCT

Jauna pieeja prostatas vēža cirkulējošu ekstracelulāro vezikulu selektīvai izolēšanai un to ietverto RNS biomarķieru analīze

subject

description

Audzēju producētās ekstracelulārās vezikulas (EVs) ir ieguvušas ievērojamu uzmanību zinātnieku vidū pēdējo gadu laikā, kā daudzsološs biomarķieru avots ar potenciālu pielietojumu vēža diagnostikā, prognostikā un monitorēšanā. Pacientu biofluīdos cirkulējošo EV izmantošanu šiem mērķiem apgrūtina tas, ka vēža izcelsmes EVs bieži sastāda zemu proporciju no kopējā parauga EV satura un šī proporcija mēdz atšķirties pacientu starpā. Tādēļ vajadzīgs meklēt jaunas pieejas, kas ļautu selektīvi izolēt un analizēt noteiktas EV subpopulācijas, kas bagātinātas ar vēža izcelsmes biomarķieriem. Adresējot šo aktualitāti, bakalaura darbā tika attīstīta un testēta jauna EV subpopulāciju izolēšanas metode – ar antivielām noklātu magnētisko nanodaļiņu (MNP) izmantošana. Konjugēšanai ar MNP tika izmantotas antivielas pret PSMA (prostatas specifisks marķieris) un CD63 (universāls EV marķieris) un, testējot konstruktus ar bioreaktorā ģenerētām PSMA+ LNCaP līnijas EVs, apstiprināts, ka tie ar augstu efektivitāti spēj piesaistīt attiecīgās EV populācijas. Tālākie rezultāti liecināja, ka imunoafīni izolētas PV pacientu urīna EVs satur augstāku mērķa subpopulācijas līmeni, nekā ar SEC izdalītā EV populācijā. Sākotnējie ddPCR testi apstiprināja PV marķiera miR-375 klātbūtni imunoafīni izlolētās PV pacientu urīna EV subpopulacijās.