6533b85bfe1ef96bd12bb89e
RESEARCH PRODUCT
Augu vīrusu strukturālo proteīnu domēni antigēnu multimerizācijai
Irena Barkovskasubject
imunizācijaimunotagsPADREBioloģijaapvalka proteīnsgurķu mozaīkas vīrussdescription
Maģistra darba mērķis ir pārbaudīt ekspresēto un attīrīto ApMV un CMV CP N-gala sajūgtos domēnus ar eGFP un PADRE T-šūnu epitopu oligomerizācijas īpašības un imunogenitāti peļu modelī, salīdzinot datus ar veselas vīrusveidīgās daļiņas imunogenitāti, ko varētu izmantot turpmākiem eksperimentiem imunoloģiski nozīmīga epitopa pārbaudē. Maģistra darbs tika izstrādāts no 2016. gada septembra līdz 2018. gada maijam Augu virusoloģijas grupā Latvijas Biomedicīnas pētījumu un studiju centrā, Dr. biol. Andra Zeltiņa un Dr. biol. Inas Baļķes vadībā. Darba gaitā, papildus bakalaura darba ietvaros izveidotām konstrukcijām, tika izveidotas vēl divas konstrukcijas, kur CP N-terminālie domēni, papildus eGFP modeļproteīnam un sešu histidīnu atkārtojumiem, tika ģenētiski savienoti ar PADRE T-šūnu epitopu. Sajūgtie proteīni tika noekspresēti un attīrīti ar afīno hromatogrāfiju. Proteīnu attīrīšanas gaitā, kā arī pateicotis veiktām nukleīnskābes kustīguma nobīdes, dinamiskās gaismas izkliedes, masas spektrometrijas un elektronmikroskopijas eksperimentiem, tika noskaidrots, ka nCMV proteīni RNS klātbūtnē oligomerizējas, PADRE T-šūnu epitopa klātbūtne padara konstrukcijas par nestabilām, nApCP proteīni ir pakļauti spēcīgai proteolīzei un nav izmantojamas tālākiem pētījumiem. Imunizācijas eksperimenti peļu modelī parādīja, ka katra pievienotā imūnstimulējošā koponente izveidotajam imunotagam paaugstina imūno atbildi.
| year | journal | country | edition | language |
|---|---|---|---|---|
| 2018-01-01 |