6533b85efe1ef96bd12bf75c

RESEARCH PRODUCT

Clostridium ģints baktēriju noteikšana dzeramajā ūdenī izmantojot Fluorescento in situ hibridizāciju

subject

description

Bakalaura darba mērķis bija ātri un precīzi identificēt dzeramajā ūdenī Clostridium ģints baktērijas izmantojot Fluorescento in situ hibridizāciju. Līdz ar to tika izmērīts un salīdzināts fluorescences intensitātes līmenis dažādām Clostridium sugām, kā arī citiem mikroorganismiem izmantojot Clostridium spp. specifiskas fluorescentās zondes. 92% no Clostridium acetobutylicum izmērītam šūnām, relatīvās gaismas vienības (RLU) pārsniedza 500 vienību robežu, 99% no Clostridium beijernickii un 96% no Clostridium tetahomorphum, salīdzinājumā ar Sphingomonas paucimobilis, kur tikai 2% pārsniedza 300 RLU. Veiktais variācijas analīzes tests (ANOVA) liecināja, ka starp Clostridium ģints baktērijām un Sphingomonas paucimobilis pastāv būtiska fluorescences atšķirība (p<0.05). Papildus tam tika sagatavoti un analizēti mākslīgi piesārņoti paraugi, kuros izdevās precīzi noteikt pievienoto klostrīdiju koncentrāciju. Balstoties uz iepriekš iegūto informāciju par šūnu fluorescenci, tika analizēti 12 dažādas izcelsmes Latvijas dzeramā un virszemes ūdens paraugi. Mikroskopēšanai tika izmantota metodika, kas nodrošina iespēju aplūkot 1/5 daļu mikroskopa parauga laukuma un tādējādi samazināt noteikšanas robežas līdz 5 šūnām analizējamā parauga tilpuma vienībā. Vides paraugu analīžu rezultāti parādīja, ka Clostridium ģints pārstāvji nav sastopami. Kopumā metodei vēl ir nepieciešami uzlabojumi, lai galvenokārt samazinātu fona fluorescences intensitāti un palielinātu šūnu fluorescences intensitāti, īpaši, ja tiek analizēti ļoti piesārņoti paraugi.