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Efectos anticancerosos de polifenoles naturales: Peterostilbeno y quercetina.

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La inhibición del crecimiento tumoral sobre el melanoma B16-F10, trans-resveratrol (t-RESV), un estilbeno natural, está limitada por su baja biodisponibilidad (Asensi y cols.,2002). La biodispoponibilidad de cualquier sustancia depende entre otros factores, de suestructura química. El t-RESV en su estructura química posee tres grupos hidroxilo,susceptibles de sufrir reacciones de conjugación y por tanto, de sufrir una rápida eliminación.Modificamos su estructura química para aumentar su concentración plasmática a lo largo deltiempo. Ello se ha de realizar teniendo en cuenta que el grupo hidroxilo en posición 4' y suconfiguración trans son condiciones indispensables para ejercer sus actividades enconcreto, la actividad anticancerosa. Por tanto, nos quedan dos grupos hidroxilo en posición3 y 5 que cambiamos por grupos metoxilo pudiendo disminuir así el grado de metabolizaciónhepática. Con estas modificaciones llegamos hasta una estructura polifenólica que coincidecon un estilbeno natural, el trans-pterostilbeno (t-PTER). Este compuesto presentabaactividad anticancerosa y antidiabética entre otras.La quercetina (QUER) es un flavonoide que se introdujo en nuestros ensayos porque podíaaumentar la biodisponibilidad de t-PTER ya que se había demostrado que competía con el t-RESV por el metabolismo hepático y porque podía ejercer una sinergia antitumoral, ya quepresentaba propiedades anticancerosas.Sintetizamos en el laboratorio, el t-PTER y realizamos los ensayos oportunos junto con laQUER.Primero se realizaron estudios de biodisponibilidad. Las concentraciones plasmáticas deambos polifenoles tras la administración de 20mg de t-PTER y QUER /kg de peso de ratónvía oral fueron bajas, lo que no ocurrió tras la administración i.v., con las que obtuvimos lasconcentraciones plasmáticas medias de los obtenidas tras su administración. Estas fueron40 y 20 uM para el t-PTER y la QUER, respectivamente. Concentraciones que se utilizaronen los ensayos in vitro aplicados durante una hora, cada día. Además la semivida biológicadel t-PTER fue 78 min muy superior de la del t-RESV (14 min).En segundo lugar, se estudió la actividad antitumoral de estos polifenoles a concentracionesbiodisponibles. Tras los ensayos de actividad antitumoral in vitro e in vivo, se demostró queel t-PTER actuaba impidiendo la adhesión de las células tumorales (B16M-F10) al endoteliosinusoidal hepático (HSE) por inhibición de la expresión de VCAM-1 en el endotelio. El t-PTER y la QUER principalmente, actuaban aumentando la toxicidad de las células B16MF10adheridas por aumento de la expresión de genes proapoptóticos (BAX, BAD, BAK yBID) y disminución de la expresión de genes antiapoptóticos (bcl-2, bcl-xL, bcl-w). Ambosdisminuyeron la metástasis tumoral in vivo en un 73% y duplicaron los días de supervivenciade los animales enfermos. Tratando a los ratones con 20mg de t-PTER y QUER/ kg de peso,por vía i.v cada día.En tercer lugar, estudiamos el mecanismo por el cual, ambos polifenoles aumentaban lacitotoxicidad de las células tumorales. Para ello, nos centramos en la producción de óxidonítrico (NO) por parte de las B16M-F10 y el HSE (durante su interacción con las célulastumorales). Comprobamos que t-PTER y QUER, actuaban sobre las células tumorales, ensituación previa a su interacción con el endotelio, inhibiendo la expresión de iNOS,reduciendo el nivel de NO por la células tumorales, ello provocó la disminución de laexpresión del gen bcl-2 vía inhibición de la fosforilación de el factor de transcripción CREBconduciendo de esta manera a la apoptosis celular. Por otro lado, t-PTER y QUER, actúandurante la interacción de las células B16M-F10 al HSE, aumentando la expresión de eNOS,de esta forma el endotelio produce más NO que provoca un daño celular directo y laapoptosis de la célula tumoral vía activación de la esfingomielinasa neutra dependiente deMg y aumento de ceramida.