6533b863fe1ef96bd12c7b85

RESEARCH PRODUCT

Augstas kapacitātes ārpusšūnu vezikulu izdalīšana ar plūsmas lauka frakcionēšanas metodi mikrofluīdikā

subject

description

Visas šūnas, tostarp vēža šūnas, izdala nanoizmēra ārpusšūnu vezikulas (EVs), kas satur svarīgas biomolekulas – miRNS, proteīnus un daudzas citas. EVs nodrošina šūnu savstarpējo komunikāciju, regulējot gan normālos gan patoloģiskos apstākļus. Šobrīd tās ir intensīvi pētītas kā potenciālie biomarķieri dažādu slimību diagnostikā un terapijā. Neskatoties uz EV priekšrocībām to izolēšanas metodes kavē EV pielietojumu klīniskajos pētījumos. Uz doto brīdi ir izstrādāti dažādi risinājumi pielietojot mikrofluīdikas ierīces, kas neietekmē EV integritāti un tām ir laba atkārtojamība, taču šīs ierīces ir domātas maza tilpuma paraugiem - serumam un asinīm. Šī darba mērķis ir izveidot mikroiekārtu, kas izdala totālo EV daudzumu no liela tilpuma paraugiem (>10 mL) un ar augstu efektivitātes līmeni (>90%). Tika izveidots kontroles paraugs, ar kuru tika testēts PDMS (polidimetilsiloksāns) un dažādu citu mikrofluīdikas materiālu EV un mazmolekulāro hidrofobisko molekulu absorbcijai. OSTE (Off-stoichiometry thiol-ene polymer) no visiem testētajiem materiāliem tika atrasts kā vispiemērotākais mikrofluīdikas ierīču izveidē, kas būtu domāts EV izolēšanai. Tika izgatavots PDMS materiāla mikroiekārtas prototips uz kura tika optimizēti parauga ievadīšanas spiedieni izmantojot kontroles paraugu. Tika noskaidrots, ka mazāki spiedieni sniedz labākus rezultātus, taču ir nepieciešams veikt turpmāko šo iekārtu optimizāciju un iekārtu izgatavošanas protokolu optimizēšanu no OSTE.