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RESEARCH PRODUCT

ACTIVIDAD DE LA SER/THR FOSFATASA PP2A Y REGULACIÓN EPIGENÉTICA DE GENES PRO-INFLAMATORIOS EN LA PANCREATITIS AGUDA

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Objetivos 1) Estudiar el papel de las serin/treonin protein fosfatasas en la induccion de genes pro-inflamatorios en el pancreas en la pancreatitis aguda, 2) Investigar el papel de las serin/treonin fosfatasas en el mecanismo de accion de la pentoxifilina como agente inflamatorio en la PA. Diseno Modelo de PA necrotica en ratas inducida por taurocolato sodico al 3,5%. Determinacion en pancreas de ratas de la fosforilacion de ERK y MEK1/2 (western blotting), las actividades de las serin/treonin fosfatasas PP2A, PP2B y PP2C, la induccion de genes pro-inflamatorios (RT-PCR e immunoprecipitacion de la cromatina) y el reclutamiento de factores de transcripcion e histonas acetiltransferasas/deacetilasas (immunoprecipitacion de la cromatina). Estudios en celulas acinares AR42J. Resultados Las actividades de las serin/treonin protein fosfatasas PP2A, PP2B y PP2C en la PA (1 h post-induccion) disminuyeron en un 50%, 57% y 29%, respectivamente, respecto a los controles. La perdida de la actividad PP2A esta mediada por una disminucion en los niveles de AMPc. La pentoxifilina actua inhibiendo la actividad fosfodiesterasa, impidiendo la perdida de la actividad PP2A inducida por el taurocolato in vivo e in vitro, sin afectar a las demas ser/thr fosfatasas. La pentoxifilina previene la induccion de genes de respuesta temprana (egr-1, atf-3) y tardia (inos, icam, il-6, tnf-alpha), y el reclutamiento de las histonas acetiltransferasas a sus promotores genicos, asi como el reclutamiento de factores de transcripcion (NF-kB y C/BPbeta) en en el curso de la pancreatitis. Conclusiones La perdida de actividad protein fosfatasa PP2A puede ser un elemento clave en el inicio de la cascada inflamatoria en la pancreatitis aguda. El efecto beneficioso de la pentoxifilina y presumiblemente de otros inhibidores de fosfodiesterasas en esta enfermedad estaria mediada por la prevencion de la perdida de los niveles de AMPc y de la actividad PP2A en etapas muy tempranas de la pancreatitis aguda.