Listeria monocytogenes transpeptidāzes Sortāzes A inhibitoru atlase izmantojot uz fluorescences rezonanses enerģijas pārnesi (FRET) bāzētu skrīningu

2016

Darba mērķis ir atrast jaunus inhibitorus, kas kavē Listeria monocytogenes transpeptidāzes sortāzes A veikto hidrolīzes reakciju, inhibējot sortāzes A darbību. Šī mērķa sasniegšanai tika izveidota DNS konstrukcija, kas kodē Listeria monocytogenes sortāzes A katalītisko domēnu. Tā kā vislabāk izpētīta ir Staphylococcus aureus sortāze A, papildus tika izveidota tās katalītisko domēnu kodējoša DNS konstrukcija. Ekspresija tika sekmīgi veikta E. coli ekspresijas sistēmā, abi proteīni bija šķīstoši. Sortāzes inhibitori tika atlasīti izmantojot augstas caurlaidības skrīningu, kas tika balstīts uz fluorescences rezonanses enerģijas pārnesi (FRET). 705 potenciālo inhibitoro savienojumu skrīninga re…