6533b7dbfe1ef96bd1270e92

RESEARCH PRODUCT

Melanokortīna otrā tipa receptora un tā palīgproteīna ekspresija rauga Pichia Pastoris ekspresijas sistēmā

Ance Roga

subject

proteīnsekspresijas sistēmaMC2RBioloģijaMRAPPichia Pastoris

description

Darba ietvaros tika izveidots pPIC9K- MC2R-T4L ekspresijas konstrukts, kas tika ekspresēts P.Pastoris sistēmā. Western blot analīze uzrādīja nepieciešamās molekulmasas zonu. MC2R-T4L izdevās attīrīt uz His- un Ha-tag afinitātes kolonnām. Lai noteiktu funkcionāla MC2R struktūru, to nepiecieciešams ekspresēt kompleksā ar MRAP, tādēļ tika izveidoti vairāki MC2-MRAP konstrukti, ko tālāk izmantot proteīna ekspresijai P. Pastoris šūnās. To aktivitāte tika pārbaudīta zīdītāju šūnu līnijās nosakot cAMP daudzuma izmaiņas pēc stimulācijas ar ACTH (1-24). Iegūtie rezultāti bija nestabili, tādēļ tālākajos pētījumos tiks veikta radioaktīvā ACTH saistīšanas mērījumus. Darbs tika veikts no 2013.gada jūnija līdz 2015. gada jūnijam Latvijas Biomedicīnas pētījumu un studiju centrā.

https://dspace.lu.lv/dspace/handle/7/29476