Search results for "imūnfluorescence"
showing 5 items of 5 documents
Cilvēka aizkuņģa dziedzera organoīdu raksturošana: vizualizācijas un kvantificēšanas metožu pielāgošana
2022
Organoīdi ir pašorganizējošas 3D šūnu struktūras, kuru uzbūve un šūnu hierarhija atgādina to izcelsmes audus. Šī līdzība ļauj tos izmantot dažādos pētījumos. Darba mērķis ir raksturot aizkuņģa dziedzera organoīdus, izmantojot mikroskopēšanas metodes un pielietot attēlu kvantificēšanas programmas attēlu analīzei. Organoīdu attēlu analīze ir netriviāla, jo organoīdiem ir atšķirīgas formas un izmēri, bet šūnas tajos atrodas dažādās plaknēs. Salīdzinot veselu organoīdu iezīmēšanas metodi ar imūnfluorescenci uz kriotoma griezumiem metodi, kvalitatīvāku informāciju sniedz veselu organoīdu iezīmēšanas metode. Neskatoties uz to, abas pieejas apstiprina izveidoto aizkuņģa dziedzera kanāliņu fenotipu…
COX-2 ekspresijas inducēšana LPS iekaisuma modelī neiroblastomas SH-SY5Y šūnu līnijā
2015
COX-2 ir COX izoenzīms, kas atbild par arahidonskābes metabolismu, sintezējot bioloģiski aktīvus iekaisuma mediatorus – prostanoīdus. Perifērijā COX-2 ir inducējama izoforma, bet smadzenēs – konstitutīva. Šī darba mērķis bija izpētīt LPS spēju inducēt COX-2 ekspresiju neiroblastomas SH-SY5Y šūnās. COX-2 ekspresijas noteikšanai tika izmantota imūnfluorescences metode. Rezultāti uzrādīja SH-SY5Y šūnu morfoloģijas izmaiņas dažādu LPS koncentrāciju (5 – 800 ng/ml) ietekmē. Pētījumā novēroja COX-2 ekspresiju kontroles šūnās normālos apstākļos, LPS koncentrācijā 5 ng/ml COX-2 ekspresijas indukciju, bet koncentrācijā 25 ng/ml un 50 ng/ml – supresiju. Statistiski ticamu rezultātu uzrādīja LPS konce…
Cilvēka aizkuņģa dziedzera organoīdu 3D modeļa izveide
2021
Pareizos kultivēšanas apstākļos, pieauguša organisma epitēlijšūnas spēj pašorganizēties un veidot organoīdus. Šādas 3D šūnu kultūras, spēj labāk atdarināt audu struktūru un funkcijas, kas piemīt attiecīgajam orgānam, paverot iespēju šajā darbā, pētīt aizkuņģa dziedzera fizioloģisku un patoloģisku procesu norisi. Maģistra darba mērķis ir izveidot aizkuņģa dziedzera organoīda modeli, tālākai aizkuņģa dziedzera slimību izpētei. Darba gaitā tika izveidotas Wnt3A un Rspo-1 kondicionētas barotnes, organoīdu kultūras no cilvēka aizkuņģa dziedzera normālu audu un audzēja rezekcijas pēcoperācijas materiāla. Tika izveidoti arī peļu aizkuņģa dziedzera organoīdi, veikta to fenotipiska raksturošana un k…
Atšķirīgu barotņu ietekme uz krūts vēža šūnu līniju fenotipiskām pazīmēm
2016
Krūts vēzis ir ļaundabīgs audzējs, kas atšķiras gan viena audzēja ietvaros, gan starp indivīdiem. Lai noskaidrotu pacientam piemērotāko ārstēšanas veidu, tiek noteikti vēža tipi pēc tos veidojošo šūnu morfoloģijas, producētajiem receptoriem, kā arī gēnu ekspresijas. Šūnu kultūrās barotņu sastāvs un citi augšanas apstākļi ietekmē kultivēto šūnu signālprocesus un gēnu ekspresiju. Darbā tika pārbaudīta četru atšķirīgu barotņu ietekme uz krūts vēža līniju (MCF7 un MDA-MB-231) un fibroblastu (HDFa) šūnu līnijas augšanu un fenotipu. Atšķirības tika konstatētas, imūnfluorescenti salīdzinot proteīnu ekspresijas intensitāti, izmantojot augstas caurlaidspējas attēlieguves sistēmu InCell analyzer 2200…
Hipofīzes adenomu šūnu raksturojums
2018
Hipofīzes adenoma ir populācijā bieži sastopams labdabīgs smadzeņu audzējs. Šobrīd trūkst informācijas par iespējamiem audzēja veidošanās mehānismiem un tā attīstību veicinošām mutācijām. Šajā pētījumā ir apkopoti 10 hipofīzes adenomu pacientu dati, kas iegūti ar molekulārām un šūnu bioloģijas metodēm. No hipofīzes adenomu operāciju materiāla tika iegūtas heterogēnas šūnu kultūras, kas tika raksturotas pēc audzēja un cilmes šūnu marķieriem, ka arī mutāciju spektra, izmantojot imūnfluorescentās krāsošanas, plūsmas citometrijas, vienas šūnas pilna genoma amplifikācijas un eksonu sekvenēšanas metodes. Rezultāti liecina, ka no hipofīzes adenomas paraugiem ir iespējams iegūt dzīvotspējīgas sfēra…