�ber die Bedeutung von Sulfhydrylgruppen f�r Prozesse am Aktomyosin

Elektrophorese von Proteinen in Filterpapier

Isolierung, Trennung und Charakterisierung von Peptiden, Peptid-Derivaten und verwandten Verbindungen

Nach dem heutigen Stand der Erfahrungen empfiehlt sich fur die Trennung von Peptidgemischen neben der Verteilungschromatographie 3 (diese vor allem fur kleinere Peptide) besonders die Methode des Ionenaustauschs (auch bei hohermolekularen Peptiden). Im Fall des Vorliegens komplexer Gemische wird man vor Anwendung verteilungschromatographischer Verfahren eine Vorfraktionierung mittels Ionenaustauschern oder durch Ionophorese in Tragern (besonders in Filterpapier) vornehmen. Gelegentlich ist, besonders fur rein analytische Probleme, auch die Additionsadsorption (vor allem an Kohle) zur Fraktionierung von zusammengesetzten Eiweisspaltprodukten herangezogen worden, meist in Form der Frontanalys…

Einleitung: Entwicklung chromatographischer Verfahren in der Proteinchemie; Leistungsfähigkeit, Grenzen

Nach der Wiederentdeckung der Tswettschen1 Methodik durch R. Kuhn 2 und seine Schule hat es trotz der bedeutenden Erfolge, aus denen die uberragende Selektivitat derartiger Verfahren hervorging, noch lange gedauert, bis man Proteine und ihre Spaltprodukte in den Kreis der untersuchten Stoffe einschlos. Dabei bedurften gerade diese, in ihrem Verhalten nur allzu ahnlichen und darum schwer zu trennenden und zu reinigenden, haufig dazu hochempfindlichen Stoffe am dringendsten einer Bereicherung der methodischen Moglichkeiten, da man mit den „klassischen“ Verfahren offensichtlich an einer selbst durch weitere Verfeinerung nicht mehr zu uberschreitenden Grenze angekommen war. Willstatter 3 hat au…

Über die Wirkung von Digitoxin auf die Freilegung von Actomyosin und seinen Komponenten aus den Strukturen des Muskels

Es liegen bereits einige Untersuchungen uber den direkten Einflus von Digitaliskorpern auf die „kontraktilen“ Proteine des Herz- und Skeletmuskels vor. Mallov und Robb 1 haben gefunden, das nach Inkubation von Actomyosinfaden mit Herzglykosiden deren „Kontraktion“ verbessert war. Die Calcium-aktivierbare Adenosintriphosphatase (ATPase) des Myosins aus Herzmuskel wird nach Befunden von Guerra 2, Hegglin 3 und Edman 4 durch Herzglykoside wenig gefordert; entsprechende Befunde erhob Segre 5 am Skeletmuskel. Dagegen wird die wasserlosliche, Calcium-hemmbare ATPase von Meyeruof und Kielley 6 durch Digitaliskorper gehemmt. Die Polymerisation von G- zu F-Aktin wird nach Horvath 7 durch Herzglykosi…

Trennung, Identifizierung und Bestimmung der Aminosäuren

Zur analytischen Trennung der Aminosauren empfiehlt sich nach dem heutigen Stand der Erfahrung die Elutionsentwicklung an kernsulfurierten Harzaustauschern; auch die Starkesaule gibt gute Resultate. Fur halbquantitative und qualitative Zwecke und ganz besonders fur Reihenversuche ist die Papierchromatographie die Methode der Wahl. Fur praparative Zwecke verdient die Verdrangungsentwicklung an Ionenaustauschern den Vorzug.

Gegenstromverteilung zwischen begrenzt mischbaren Phasen („counter current distribution“)

Die Gegenstromverteilung besteht in einem stufenweisen Fraktionierungs-prozes, bei dem ein geloster Stoff zwischen zwei begrenzt mischbaren Flussigkeitsphasen in einer Reihe von „Einheiten“ verteilt wird. Der Prozes wird so durchgefuhrt, das fur jeden Stoff der Anteil in jeder „Einheit“ und in jedem Stadium des Fraktionierungsprozesses exakt einem Glied eines bestimmten binomischen Ausdrucks entspricht. Vor der Trennung der Phasen werden diese bei jedem Schritt fur eine Zeitdauer miteinander ins Gleichgewicht gesetzt, die nach dem experimentellen Befund mehr als ausreichend ist, um vollstandige Gleichgewichtseinstellung zu gewahrleisten2; es handelt sich also um einen echten Gleichgewichtsp…

Weitere Anwendungsbeispiele chromatographischer Methoden

Eine mehr oder minder vollstandige Aufzahlung der Arbeiten auf dem Gebiet der Proteinchemie, die chromatographische Methoden benutzt haben, wurde bei der Breitenentwicklung dieser Verfahren auf ahnliche Schwierigkeiten stosen wie der Versuch, eine analoge Aufstellung fur die „klassischen“ Operationen (z.B. Destillation oder Kristallisation) fur ein Teilgebiet der organischen Chemie zusammenzustellen, ganz abgesehen davon, das eine derartige systematische Aufzahlung dauernder Erganzung bedurfte; dies ist Sache der fortlaufend erscheinenden Referatenorgane. Darum seien im folgenden nur einige charakteristische, gut durchgearbeitete Beispiele fur verschiedene Anwendungsgebiete aufgefuhrt, fur …

Trennung von Abk�mmlingen der Adenosintriphosphors�ure (ATP) durch Ionophorese in Filterpapier

Theoretische Grundlagen: Begriff der Chromatographie; Zusammenhänge zwischen Konstitution und Chromatogramm

Zur Trennung von Substanzen, die ursprunglich in der gleichen Phase vorhanden sind, gibt es grundsatzlich zwei mogliche Verfahrenstypen: Verteilung zwischen zwei verschiedenen Phasen, oder Trennung durch Diffusionsmethoden unter dem Einflus von Druck-, Temperatur-, Konzentrationsgradienten usw., in Zentrifugal-, elektrischen oder magnetischen Feldern; auserdem kann man durch chemische Methoden die physikalischen Eigenschaften der zu trennenden Stoffe so andern, das die Leistungsfahigkeit dieser beiden grundlegenden Verfahren gesteigert wird4. Besonders in den letzten Jahren haben Verfahren steigende Bedeutung erlangt, in denen die Einstellung eines Gleichgewichts zwischen den Phasen „im Geg…

�ber die Differenzierung der bei Vorg�ngen am Aktomyosin beteiligten Sulfhydrylgruppen

Ionophorese bzw. Elektrophorese in Trägern

Nach einem Vorschlag von Martin und Synge 1 bezeichnet man mit Ionophorese den Transport kleiner Ionen im elektrischen Feld, wahrend Elektrophorese grose Molekule (z.B. Proteine) betrifft und unter Elektrodialyse die Entfernung kleiner Ionen von grosen Molekulen verstanden sein soll.

Proteinsynthese in Hefezellen

Mathematische Behandlung des Problems der Chromatographie

Die grosere Ubersichtlichkeit des Verteilungsvorgangs gegenuber dem Adsorptionsvorgang und seine einfachere mathematische Darstellung machen es verstandlich, das der Prozes der Verteilungschromatographie einer mathematischen Analyse leichter zuganglich ist. Martin und Synge 3 veroffentlichten 1941 eine Theorie der reinen Verteilungschromatographie, die ubrigens bei Annahme linearer Adsorptionskoeffizienten auch auf die Adsorptionschromatographie ubertragbar ist.

�ber den Einflu� von Digitoxin auf die Extrahierbarkeit von Aktin aus dem Herzmuskel

Trennung von Abk�mmlingen der Adenosintriphosphors�ure (ATP) durch Verteilungschromatographie in Filterpapier

Trennung und Charakterisierung von Proteinen

Wahrend bei Aminosauren und Peptiden Verteilung und Ionenaustausch als gleichberechtigt, die Additionsadsorption dagegen als auf Sonderfalle beschrankt anzusprechen ist, tritt die Methode der Verteilung von Eiweisstoffen (bei denen die Verhaltnisse von vornherein sehr viel komplizierter liegen) in den Hintergrund; Additionsadsorption und Ionenaustausch beherrschen hier das Feld2. Als neue Modifikation kommt bei Proteinen die Ausfallungs- (speziell Aussalzungs-)Chromatographie zu den bisher besprochenen Verfahren hinzu. Gleichzeitig tritt das Verfahren der Elektrophorese, besonders in Tragern, das in jenen Fallen wertvolle Dienste zur Vorfraktionierung leistet, hier als selbstandiges Verfahr…