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AUTHOR
D. Kranz
Die Ultrazentrifuge als Kriterium für molekulare Einheitlichkeit. Grenze des Auflösungsvermögens und der Empfindlichkeit
Die Gradientenkurve einer zusammengesetzten, in der Ultrazentrifuge sedimentierenden Grenzschicht von zwei Komponenten wird auf Grund einfacher Voraussetzungen berechnet, welche praktisch z. B. bei einer Mischung der α-Amylasen aus Bacillus subtilis und Humanspeichel zutreffen. Dabei wird ein Ausdruck fur das Auflosevermogen der Sedimentation in Einheiten molekularer und apparativ vorgegebener Konstanten abgeleitet: Diskontinuitat der Verteilung der Sedimentationskoeffizienten vorausgesetzt, ist danach fur die Ausbildung getrennter Maxima in der Gradientenkurve ein Mindestunterschied der Sedimentationskoeffizienten erforderlich, welcher sich nach dieser Formel mit dem Wert A > 1 abschatzen …
Die bestimmung von sedimentationskoeffizient, diffusions-koeffizient und molekulargewicht von α-amylasen nach der methode des aktivitätstransportes
Abstract Sedimentation and diffusion coefficients determined by optical methods on pure (crystallized) enzymes are compared with those obtained by activity measurements on the unpurified enzymes. On performing the experiments under suitable conditions, results of the two methods are in good agreement. The calculation of the molecular weights of the unpurified enzymes is somewhat uncertain because the partial specific volume in most cases is not accurately known.
Über ein verfahren zur exakten bestimmung der sedimentationskonstanten ungereinigter enzyme mit hilfe des aktivitätstestes. versuche an den glukosedehydrogenasen aus penicillium notatum (notatin) und aspergillus niger
In einer normalen Ultrazentrifugenzelle wird ein Bodenbelag aus Filtrierpapier angebracht, in welchen das Enzym hineinsedimentiert. Aus dem Aktivitatsverlust oberhalb des Bodenbelags wird die Sedimentationskonstante berechnet. Durchfuhrung und Auswertung der Versuche werden zu einer Routinemethode ausgearbeitet. Die Methode wird dazu benutzt, die Sedimentationskonstanten der beiden Glukosedehydrogenasen aus Penicillium notatum bzw. Aspergillus niger zu bestimmen. Es ergibt sich 7,91 bzw. 8,81 SVEDBERG. Die nach dem fruher beschriebenen Aktivitatstest bestimmten Diffusionskonstanten sind 5,56 bzw. 4,47 · 10−7 cm2·sec−1. Daraus ergeben sich die Molekulargewichte 138 000 bzw. 192000 und die Re…