6533b86ffe1ef96bd12cd0ae

RESEARCH PRODUCT

Die direkte quantitative auswertung von dünnschichtchromatogrammen durch remissions- und fluoreszenzmessungen

subject

description

Abstract Direct quantitative evaluation of thin-layer chromatograms by remission- and fluorescence measurements. Part 6. Determination of adrenaline, noradrenaline and dopamine from urine Adrenaline, noradrenalineand dopamine were separated from urine on aluminium oxide columns; after elution they were converted into ther O 3 ,O 4 ,N-triacetyl derivatives and separated using thin-layer chromatography. The triacetyl derivatives were in situ converted to fluorescing compounds using ethylene diamine and quantitatively estimated using the Chromatogram-Spectrophotometer (Carl Zeiss, Oberkochen). The advantage of this method over the conventional fluorometric determination of catecholamines in solution lies in the fact that the individual catecholamines present on the chromatogram are separated from each other and from fluorescing impurities and can be determined without elution from the thin layer, i.e., without loss. The precision is greater as compared with gas chromatographic analysis of urine. The relative standard deviation for the determination of the individual catecholamines is ca. ± 5%, the detection limit for physiological concentrations is ca. 75%. Adrenalin, Noradrenalin und Dopamin wurden aus Harn an Aluminiumoxid-Saulen adsorbant, nach der Elution zu den O 3 ,O 4 ,N-Triacetyl-Derivaten umgesetzt und dunnschichtchromatographisch getrennt. Die Triacetylverbindungen wurden auf der Dunnschicht-Platte mit Athylendiamin zu fluoreszierenden Produkten kondensiert und mit dem Chromatogramm-Spektralphotometer (Carl Zeiss, Oberkochen) direkt quantitativ bestimmt. Der Vorteil dieses Verfahrens gegenuber herkommlichen fluorimetrischen Bestimmungen der Catecholamine aus derselben Losung besteht darin, dass die einzelnen Catecholamine auf dem Chromatogramm getrennt voneinander und getrennt von fluoreszierenden Begleitstoffen vorliegen und ohne Elution aus der Sorptionsschicht, d.h. verlustlos, bestimmt weden konnen. Gegenuber gaschromatographischen Bestimmungsmethoden aus dem Harn ist die Genauigkeit grosser. Die relative Standardabweichung fur die Bestimmung der einzelnen Catecholamine liegt bei ± 5%, die Wiederfindungsrate bei physiologischen Konzentrationen um 75%.