Cytochemische Untersuchungen �ber den Einflu� von Bors�ure und Phenylbors�ure auf einige Oxydasen und Dehydrogenasen beiOospora lactis (Fres.) Sacc. (cf.Geotrichum candidum Link.)

Ein Zusatz von 300 mg Phenylborsaure (PhB)/l Nahrmedium fuhrt beiOospora lactis zu hefeartigem Wachstum und zu auffalligen Veranderungen der Zellgestalt. Nach Borsaure-Zusatz (300–500 mg/l) konnten die gleichen Anomalien nicht beobachtet werden.

A SIMPLE CULTIVATION CHAMBER FOR THE STUDY OF AERIAL REPRODUCTIVE ELEMENTS OF FUNGI

Cytology of Thamnidium elegans Link. II. Distribution and behaviour of nuclei in hyphae, sporangiophores and sporangiospores.

The resting nuclei in hyphae, sporangiophores and sporangiospores of sporangia and sporangiola of Thamnidium elegans consist of a large centrals nucleolus and a shell of chromatin surrounding the nucleolus. Division of the nucleus in hyphae and sporangiospores is achieved by elongation and constriction.

Cytochemische Lokalisation der Pyridoxol-Dehydrogenase (E. C. 1.1.1.1) bei Saccharomyces cerevisiae

Staining mitochondria in Saccharomyces cerevisiae.

After testing various procedures (amidoblack 10B, acid fuchsin-methyl blue, Luxol fast blue MBS-phloxine, toluidine blue O, Jams green B and pinacyanol), three stains can be recommended for staining both types of mitochondria (globose and threadlike) in the cells of Saccharomyces cerevisiae: (1) 0.1% solution of amidoblack 10B in citrate buffer (pH 3.0) for 10 min; (2) 0.01% solution of toluidine blue O in phosphate buffer (pH 6.0) for 30 min; (3) 0.01% solution of Janus green B in distilled water (pH 5.6) for 30 min. The latter stain is most specific because its staining reaction depends upon the action of the mitochondrial enzyme cytochrome c oxidase. Yet, low concentrations and short inc…

Cytologie vonThamnidium elegans Link

Mitochondrien (gefarbt mit Hilfe des Succinat-Dehydrogenase-Mediums und durch Janusgrun B), Lipide sowie das Enzym saure Phosphatase sind beiThamnidium elegans in besonderem Mase an Orten intensiver Differenzierungsprozesse zu finden, so im Spitzenbereich von Sporangiophoren im Stadium I, in Sporangien und in Sporangiolen bildenden Seitenasten. Die Sporangiolen zeigen im Gegensatz zu den meisten Sporangiosporen positive cytochemische Reaktionen, was offenbar auf Unterschiede in der Wandstruktur und damit in der Permeabilitat beruht. Im Spitzenbereich von Hyphen last sich phasenkontrastmikroskopisch ein scharf abgegrenztes Gebilde nachweisen, das moglicherweise mit dem Spitzenkorper identisc…

Der cytochemische Nachweis von Cytochromoxydase und Peroxydasen bei Pilzen

Verschiedene Nachweisverfahren fur Cytochromoxydase und Peroxydase wurden an den Pilzen Neurospora crassa, Oospora lactis und Saccharomyces cerevisiae getestet und die jeweils beste zur Zeit verfugbare Methode ermittelt. Zur cytochemischen Lokalisation der Cytochromoxydase (E.C. 1.9.3.1) ist das Amin-Amin-Verfahren von Burstone (1960) mit den Reaktionspartnern p-Aminodiphenylamin und Variaminblau B (p-Methoxy-p′-aminodiphenylamin) zu empfehlen, wobei die optimale Inkubationszeit bei allen Pilzen 30 min betragt. Die braunroten Reaktionsprodukte sind im Cytoplasma aller Pilze gleichmasig verteilt. Eine Nachbehandlung der Praparate in Cobaltacetat-Losung (Burstone, 1960) sowie die Zwischenscha…

Cytochemischer Nachweis von Hydrolasen in Pilzzellen

Die Anwendbarkeit der Tetrazoliumsalz-Methode (Lojda, 1965) und der Brom-naphthyl-glykosid-Methode (Cohen u. Mitarb., 1952; Rutenburg u. Mitarb., 1958, 1960) zum cytochemischen Nachweis von β-Galactosidase (E.C. 3.2.1.23), α-Glucosidase (E.C. 3.2.1.20) und β-Glucosidase (E.C. 3.2.1.21) in den Zellen der Pilze Neurospora crassa, Aspergillus oryzae und Saccharomyces cerevisiae (Vorkultur auf Nahrboden mit Zusatzen von Enzyminduktoren) wurde untersucht. In allen Fallen waren die TS-Medien — was die Art der Enzymlokalisation, die Empfindlichkeit und Spezifitat betrifft — dem Brom-naphthylglykosid-Verfahren uberlegen. Bei N. crassa und A. oryzae liesen sich β-Galactosidase, α- und β-Glucosidase,…

Untersuchungen zum cytochemischen Nachweis von Glukoseoxydase (E.C. 1.1.3.4) beiAspergillus niger

Mit Hilfe des Tetrazoliumsalzes Nitro-BT sowie des Intermediators Phenazinmethosulfat wurde die intrazellulare Glukoseoxydase (E.C. 1.1.3.4) vonAspergillus niger cytochemisch nachgewiesen, wobei biochemische Befunde zur Stutzung der Spezifitat der Reaktion herangezogen wurden.

Untersuchungen über den Einfluß von Coffein, Colchicin, Acenaphthen, Cumarin und 8-Hydroxychinolin auf die Kerne des Pilzes <i>Thamnidium elegans</i> Link

Die Wirkung von Coffein, Colchicin, Acenaphthen, Cumarin und 8-Hydroxychinolin auf die Kerne von Thamnidium elegans Link (Phycomycetes) wurde untersucht. Lediglich Coffein (0, 1%) rief nach einer Behandlungszeit von 24 Stunden eine auffallende Veranderung hervor, die sich in Vergroserung und Auflockerung des Chromatinmaterials auserte und die einzelnen Chromosomen deutlich erkennen lies. Die Ursache fur diese Erscheinung ist noch unbekannt.The influence of caffeine, colchicine, coumarin, acenaphthene and 8-oxyquinoline upon the nuclei of the phycomycete Thamnidium elegans Link was studied. Only pretreatment with caffeine (0, 1%, 24 hr) resulted in significant changes: enlargement and disper…

Der cytochemische Nachweis von Prolin-Dehydrogenasen, Acetaldehyd-Dehydrogenasen und Dihydrolipons�ure-Dehydrogenase in den Zellen vonSaccharomyces cerevisiae

Using the tetrazolium salt Nitro-BT, the following dehydrogenases can be demonstrated cytochemically in the cells ofSaccharomyces cerevisiae: (1)Proline dehydrogenase activity: it cannot be decided whether the formazan production is a result of L-proline: NAD(P)-2-oxidoreductase (E.C. 1.5.1.1) or of L-proline:NAD(P)-5-oxidoreductase(E.C. 1.5.1.2); (2)Aldehyde dehydrogenase activity: using the coenzymes NAD and NADP and the activators KCl and MgCl2, different reaction pictures are obtained which led to the conclusion that aldehyde: NADP oxidoreductase (E.C. 1.2.1.4) and aldehyde: NAD(P) oxidoreductase (E.C. 1.2.1 5) can be demonstrated seperately; (3)Dihydrolipoic dehydrogenase (E.C. 1.6.4.3…

Enzyme Cytochemistry of Fungi

Summary The results of a great number of investigationshave shown that enzyme cytochemical methods, which have been developed for the study of animal and human histology and cytology, can be successfully used for the study of enzyme patterns in yeasts, moulds, slime moulds, dermatophytes, phytopathogenic fungi and basidiomycetes. Whereas with the older, relatively unspecific procedures only presence or absence of enzymes could be studied, improved techniques allow the examination of the intracellular localization of enzymes under the light and especially the electron microscope. The results of those investigations are described together with methodological aspects of cultivation, incubation…

Dimethylsulfoxide as carrier in enzyme cytochemistry.

Addition of dimethylsulfoxide (DMSO) to the incubation medium of succinate dehydrogenase in a concentration of 10% enhances the staining reaction in the hyphae of the fungus Cercosporella herpotrichoides after an incubation period of 15 min. Controls without DMSO remain unstained. DMSO causes a rapid penetration of the components of the medium through the mucilage that covers the hyphae.

Der cytochemische Nachweis von Dehydrogenasen bei Pilzen

Mit Hilfe der im ersten Teil dieser Arbeit (Reiss, 1967b) beschriebenen Methodik konnten bei den Pilzen Neurospora crassa, Oospora lactis und Saccharomyces cerevisiae folgende Dehydrogenasen cytochemisch nachgewiesen werden: 1. Embden-Meyerhof-Weg: NAD-gebundene α-Glycerophosphat-Dehydrogenase (E.C.1.1.1.8), Alkohol-Dehydrogenase (E.C.1.1.1.1), D-Lactat: Cytochrom c-Oxydoreduktase (E. C. 1.1.2.4), L-Lactat-Cytochrom c-Oxydoreduktase (E. C. 1.1.2.3). Bei N. crassa konnte zusatzlich noch die Anwesenheit der NAD-gebundenen D-Lactat-Dehydrogenase (E. C. 1.1.1.28) lokalisiert werden. 2. Hexosemonophosphat-Weg: Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase (E. C. 1.1.1.49) und 6-Phosphogluconsaure-Dehydrogena…